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      學(xué)會(huì )這些,您也是酶標儀“維修員”

      發(fā)布日期: 2022-07-18
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        酶標儀在臨床實(shí)驗方面應用廣泛,用于鑒別乙肝兩對半,HIV,鑒定DNA等許多方面,可以說(shuō)它是臨床及醫學(xué)實(shí)驗*的基礎設備。
       
        酶標儀的常見(jiàn)故障及故障分析:
       
        故障一:測量的結果重現性不好,即使用空板測量誤差也在允許的范圍之外。
       
        故障分析:檢查試劑發(fā)現沒(méi)有問(wèn)題,檢查判定公式也沒(méi)有問(wèn)題,檢查光路也沒(méi)有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現卡微板的卡簧在伸縮后沒(méi)有卡到位,造成微板在測量時(shí)在機內晃動(dòng)影響測量結果不準。
       
        故障二:測量結果OD值偏低。
       
        故障分析:排除完燈的能量值偏低后,檢查發(fā)現濾光片上有灰塵,用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。
       
        測試方法:酶標儀的儀器指標在較佳狀態(tài),就儀器的精度測試和儀器的線(xiàn)性度介紹幾種測試方法。
       
        精度測試:該過(guò)程可被用于檢測不同微板之間的測量精度。
       
        使用新制備的在0.1% TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔,在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍,首先確保每孔注入200mL液體,使用492nm慮光片測量至少3次,對每一微孔進(jìn)行下列計算:
       
        (1)平均OD值;(2)較高和較低值;(3)平均值。較高和較低值之間的差值和百分比。讀數范圍在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,較高值和較低值之間的差值應該在+/一1.0%和+/一0.010OD范圍內。
       
        讀數范圍在2.000到3.000Abs同一孔平均值,較高和較低值之間的差值應在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范圍內。讀數范圍在3.000Abs以上時(shí)準確度不符合要求。
       
        酶標儀儀器線(xiàn)性度:儀器的線(xiàn)性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測量在0.1%TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列。
       
        具體方法如下:在參考光密度計上測量被稀釋的溶劑,畫(huà)出OD值對已知濃度的點(diǎn)圖,并畫(huà)出通過(guò)這些點(diǎn)的較好的直線(xiàn)。將從系列稀釋中測得的吸光度值與該圖比較從而計算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L,對每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本,以便降低因加樣引起的誤差。 測量微板使用測量模式,利用測量得到的平均OD值和每個(gè)樣本的已知濃度畫(huà)一條OD濃度的曲線(xiàn),從系列稀釋中測得的吸光值與該曲線(xiàn)比較從而計算出各稀釋度的濃度。
       
        對光度記和本儀器,比較計算的濃度,不準確度不應大于以下,使用標準濾光片492nm時(shí)吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度濾光片492nm時(shí),吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。
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